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“安全”獲得高質量的凝膠圖,您也可以擁有

版權所有,轉載請聯系基因市場部
2019-10-30

      瓊脂糖凝膠電泳分離技術是分子生物學實驗室進行分離、鑒定和提純核酸片段最常用的方法。通過在制膠時摻入或制膠后染色的方式,使熒光染料結合在核酸分子上,在特定光源的照射下便可確定核酸分子的位置。

      早期,用于核酸瓊脂糖凝膠染色的染料多為EB(溴化乙錠),EB可以嵌入到DNA分子堿基對之間,在紫外光的激發下發出強的熒光。EB由于其靈敏度高、穩定強而廣受歡迎。但由于EB為強誘變劑,具有高致癌性,實驗者在操作EB時往往“提心吊膽”。后期,EB逐漸被一些EB替代物如GoldView、GelRed、Gelsafe等所替代,此類替代物雖然毒性明顯比EB降低,但操作是還是要“小心翼翼”,且大部分仍還是采用紫外光激發,實驗操作者在觀察凝膠尤其是切膠時還是會暴露在紫外下。我們知道紫外線照射,會導致基因突變,人體長時間接受紫外線的照射甚至會誘發皮膚癌。


有沒有安全一點的成像方法呢?

當然有。藍光成像了解一下。


藍光成像


      藍光成像所采用的DNA結合染料最佳激發波段不再是300nm左右的紫外波段,而是集中在400-500nm左右的藍光波段。藍光成像相較于紫外成像具有更安全、檢測靈敏度更高和對DNA無損傷等優點。



更安全

       常見的藍光染料如GeneFinder、SYBR Green等,其致突變性遠低于EB數倍甚至數十倍。且此類染料最佳激發波長多是在400-500nm的可見光,檢測時采用可見藍光激發,整個凝膠檢測或回收過程中操作者無需暴露在紫外下, 避免紫外對人體潛在的傷害。


靈敏度更高

      常見的藍光染料,如GeneFinder至少可檢測出50pg DNA,檢測核酸的靈敏度比EB染色法平均高10倍左右。SYBR Green I至少可檢出20pg DNA, 靈敏度比EB染色法高10至25倍。


對DNA無損傷

       紫外光會造成核酸突變、缺刻等,影響下游的PCR擴增效率、產物回收、連接轉化效率(某公司曾做過實驗,將1.25 kb的基因片段在紫外光下暴露2分鐘,再切膠回收、連接、轉化,結果發現平板上的克隆數幾乎為零)、RT-PCR擴增效率等。藍光作為一種可見光對DNA樣品無任何損傷,不會影響下游實驗效果。



聽起來不錯耶,那哪里可以買到帶藍光的凝膠成像儀呢?

找基因有限公司呀!


G:BOX F3凝膠成像系統


      G:BOX F3凝膠成像系統,采用500萬像素高分辨率CCD檢測器,F1.2電動變焦鏡頭,結合操作簡單的圖像采集軟件,您可以快速獲得銳利的圖片。

      當進行藍光成像時您需要選擇UltraBright-LED藍光透照儀,該透照儀內含224個高強度LED燈,為成像提供高強度、均一的藍光光源。結合藍光染料,您不僅可以“安全”獲得高質量的凝膠圖,還可以“安全”的進行切膠操作。


如上PCR產物凝膠電泳圖來自中山大學,GeneFinder染色,UltraBright-LED藍光透照儀激發,G:BOX F3凝膠成像系統拍攝。


   基因有限公司作為英國Syngene公司中國區獨家代理商,為您提供常規凝膠成像系統、專業化學發光成像系統、高級熒光化學發光成像系統以及2D電泳專業分析軟件等。欲了解詳情,請聯系您身邊的基因有限公司或直接回復本公眾號。


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